La chromatographie liquide à haute performance, ou HPLC, est une technique d’analyse couramment utilisée dans le monde de la chimie et de la biochimie. Utilisé pour identifier et séparer les composés, l’équipement HPLC est beaucoup plus avancé que les autres formes de chromatographie sur colonne. Comprendre les avantages et les inconvénients aide les scientifiques à apprécier le fonctionnement complexe de la CLHP.
Sommaire de cette fiche pratique
Résultats rapides
HPLC, un outil moderne utilisé pour séparer les composés en fonction de leur polarité, fonctionne beaucoup plus rapidement que ses prédécesseurs. Les méthodes traditionnelles de chromatographie sur colonne reposent sur le travail de la gravité pour séparer les composés. Avec l’avènement de la CLHP, les composés peuvent être séparés à l’aide d’une pompe à pression qui force les composés à se séparer extrêmement rapidement – normalement en quelques minutes.
Résultats haute résolution
Comme la CLHP fonctionne grâce à l’utilisation d’une pompe qui produit des pressions élevées, les composés sont bien séparés et faciles à lire, ce qui signifie qu’ils ont une résolution élevée. D’autres méthodes de séparation qui reposent sur la gravité entraînent souvent une faible séparation ou l’absence de séparation dans certains cas, ce qui rend les résultats de lecture difficiles.
Technologie coûteuse
Le coût de la CLHP est beaucoup plus élevé que celui de ses prédécesseurs. Par conséquent, si vous travaillez dans une installation de recherche ou un laboratoire dont le financement est faible, vous pourriez trouver difficile d’acheter de l’équipement de CLHP.
Complexité
L’utilisation d’une machine HPLC nécessite une formation pour s’assurer qu’elle est correctement exécutée. Comme cette machine est complexe, les faux résultats sont fréquents lorsqu’elle n’est pas utilisée correctement.
Faible sensibilité
Pour certains composés, on sait que la CLHP n’est pas extrêmement sensible, ce qui entraîne souvent une mauvaise lecture. Ceci est dû à la vitesse à laquelle le processus se déroule.
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