Les inconvénients des médias solides

Un milieu de croissance, également connu sous le nom de milieu de culture, est un solide liquide ou gélatineux dans lequel ou sur lequel les microbiologistes cultivent des micro-organismes. Une percée majeure dans l’identification des micro-organismes s’est produite lorsque Robert Koch et ses collègues ont mis au point les techniques nécessaires à la croissance et à l’isolement d’espèces individuelles de bactéries à l’aide de milieux solides. Bien que l’invention des milieux solides et ses nombreux avantages aient révolutionné le domaine de la microbiologie, elle présente certains inconvénients.

Composition

Lorsqu’on cultive des micro-organismes, comme les bactéries, il faut leur fournir des conditions environnementales et nutritionnelles semblables à celles que l’on trouve dans leur habitat naturel. Un milieu de croissance doit fournir tous les besoins nutritionnels nécessaires à la croissance, y compris l’eau, une source de carbone et d’énergie, une source d’azote, des oligo-éléments et des facteurs de croissance. Les ingrédients courants des milieux de croissance comprennent l’eau, la gélose, l’extrait de viande, l’extrait de levure, l’extrait de malt, la peptone et l’hydrolosate de caséine.

Cohérence

Les milieux de croissance sont classés de nombreuses façons, dont l’une d’entre elles est l’uniformité. Les milieux liquides, communément appelés bouillons, sont disponibles dans des bouteilles, des flacons et des éprouvettes. Un milieu solide est un milieu liquide auquel un agent solidifiant, habituellement une gélose, a été ajouté. La gélose est composée de molécules de sucre liées, appelées polysaccharides, et est obtenue à partir de certaines espèces d’algues rouges marines. Il fond à 100 degrés Celsius et se solidifie à environ 43 degrés Celsius. Les supports solides sont utilisés sous forme de plaques ou d’obliques. Les plaques sont des contenants cylindriques peu profonds, munis de couvercles, appelés boîtes de Pétri, qui contiennent des milieux solides. Les coupes sont faites en versant le milieu fondu dans des tubes et en les refroidissant à un angle pour créer une longue surface de croissance inclinée. Une concentration de gélose de 1,5 % est typique pour les plaques et les obliques.

Avantages

Les milieux solides sont utiles lorsqu’il est probable qu’un échantillon contient une population bactérienne mixte. Lorsque les plaques sont correctement inoculées, les bactéries se développent en tant qu’unités distinctes formant des colonies. Ceci permet une identification présomptive basée sur l’apparence d’une colonie bactérienne et permet la préparation de sous-cultures pures. L’identification préliminaire précoce aide les médecins à faire des choix de traitement en temps opportun. Les sous-cultures pures permettent l’identification bactérienne définitive et les tests de sensibilité aux antimicrobiens. Les contaminants bactériens sont aussi facilement visibles sur les milieux solides.

Inconvénients

Les microorganismes ont des besoins en oxygène différents. Les organismes aérobies ont besoin d’oxygène alors que les organismes anaérobies ne survivent qu’en son absence. Contrairement aux milieux liquides, les milieux solides ne favorisent pas la croissance simultanée de bactéries aérobies et anaérobies. Par conséquent, les plaques en double doivent être inoculées et incubées dans les deux atmosphères. Les milieux solides ne peuvent pas accommoder de grands volumes d’inocula, typiquement ceux supérieurs à 0,05 ml. Comme les plaques sont peu profondes et ont de grandes surfaces, elles peuvent se déshydrater rapidement et perdre leur capacité à soutenir la croissance en quelques jours si des mesures de prévention de l’évaporation ne sont pas prises.