En biologie, un hémocytomètre est utilisé pour déterminer la concentration des cellules dans une suspension. Ces dispositifs ont été développés à l’origine pour effectuer des tests sanguins — il s’agit d’un type de chambre de comptage qui détermine le nombre de cellules par unité de volume dans une suspension. Ceci peut être utilisé pour compter presque tous les types de cellules, y compris les cellules bactériennes. L’hémocytomètre est utilisé en combinaison avec un microscope afin que vous puissiez compter le nombre de cellules telles qu’elles apparaissent sur une grille.
Nettoyer la surface réfléchissante à l’intérieur de l’hémocytomètre à l’aide d’une feuille de papier à lentilles. Nettoyez également la lamelle de la même manière. Lorsque la lamelle est propre, placez-la à l’intérieur de la chambre, sur le dessus de la surface de comptage.
Diluez suffisamment votre suspension pour que les particules de la suspension ne se chevauchent pas et ruinent votre compte.
Rassembler une quantité de la solution à l’aide d’une pipette et presser la suspension dans le puits en forme de V pour que la surface réfléchissante soit à peine recouverte de la suspension.
Placez la chambre de comptage sur la platine du microscope, puis réglez votre microscope à faible puissance afin de mettre au point la grille de comptage. Ensuite, ajustez le grossissement pour reconnaître le type de bactérie que vous regardez.
Comptez le nombre de cellules bactériennes dans chaque petite grille. Vous devrez développer votre propre modèle de comptage en fonction de la taille des cellules. Si les cellules sont grandes, compter le nombre de cellules dans les quatre carrés d’angle, plus le carré central.
Déterminer la concentration des cellules dans la suspension. Disons que vous avez compté 200 cellules dans les cinq carrés principaux. Chaque carré que vous comptez a un volume de 0.004mm cubé, donc si vous avez compté cinq carrés, leur volume combiné est de 0.02 millimètre cubé.
Divisez le nombre de cellules que vous avez comptées par le volume total des carrés. Ainsi, si vous comptiez 200 particules dans un volume cubique de 0,002 millimètre cube, la concentration serait de 200/0,02, ce qui équivaut à 10 000 cellules par mm cube.
Multipliez le volume obtenu par 1 000, puisqu’il y a 1 000 millimètres cubes dans un centimètre cube, ce qui équivaut à un millilitre. Ainsi, votre concentration résultante serait de 10 millions de cellules par millilitre.
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