La réaction en chaîne de la polymérase, ou PCR, est une méthode que les scientifiques utilisent pour faire des millions de copies d’un segment d’ADN. Les polymérases — un type de protéine enzymatique — aident à construire les nouveaux segments. Les scientifiques utilisent souvent la polymérase Taq dans la PCR.
Sommaire de cette fiche pratique
Histoire
La Taq polymérase provient de la bactérie Thermus aquaticus, qui vit dans les sources chaudes. Kary Mullis et Fred Faloona ont initialement développé la PCR au milieu des années 1980 en utilisant une polymérase d’Escherichia coli, mais les scientifiques ont rapidement commencé à utiliser le Taq dans la PCR parce qu’il était plus adapté aux températures élevées.
Fonction
La PCR implique des étapes de dénaturation, de recuit et de réplication, généralement répétées 20 à 30 fois. La dénaturation sépare l’ADN double brin en brins simples. Lors de l’étape de recuit, les amorces se lient aux segments d’ADN à copier. La polymérase Taq va travailler dans l’étape de réplication : la polymérase construit chaque brin d’ADN marqué par une amorce dans un nouveau segment d’ADN double brin.
Avantages
Les températures élevées requises pour dénaturer l’ADN ont détruit la polymérase E. coli utilisée à l’origine dans la PCR, ce qui nécessite l’ajout d’une nouvelle polymérase après chaque cycle de PCR. La polymérase Taq peut résister à ces températures, de sorte que les scientifiques peuvent maintenant exécuter de nombreux cycles PCR automatiquement.
Considérations
Taq polymérase fait un nombre relativement élevé d’erreurs lors de la copie de l’ADN. D’autres polymérases qui sont stables à des températures élevées ont des taux d’erreur plus faibles, mais le Taq est toujours le plus largement utilisé en raison de sa fiabilité et de sa polyvalence, selon l’Université de l’État du Colorado.
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