La CLHP, ou chromatographie liquide à haute performance, est une technique analytique réalisée dans de nombreux laboratoires lors de la séparation de composés chimiques dans un mélange. Un échantillon est injecté et transporté dans le système par une série de pompes à liquide. L’échantillon est séparé par la colonne HPLC et entre dans un détecteur qui analyse chaque composant chimique. Cependant, certains échantillons analytiques ne sont pas optimaux pour l’analyse CLHP. Comprendre les forces et les faiblesses d’une CLHP aidera les scientifiques à déterminer quand il convient d’utiliser ce type d’instruments.
Sommaire de cette fiche pratique
Avantages : Temps d’analyse court
La CLHP exige l’utilisation de pompes à haute pression pour pousser l’échantillon liquide à travers une colonne à alésage étroit remplie de billes de silice. Ces pompes fonctionnent à des pressions allant de 100 à 400 bars de pression, en fonction du solvant et de la taille de la colonne utilisée. Après la séparation de l’échantillon à travers la colonne, un échantillon suivant peut être injecté après une courte période de temps. Cela permet un haut débit d’analyse d’échantillons, ce qui prend quelques minutes par échantillon au lieu des heures avec la chromatographie traditionnelle.
Avantages : Polyvalence
La CLHP permet d’analyser une grande variété de composés organiques. Contrairement à la chromatographie en phase gazeuse, les échantillons CLHP ne nécessitent pas de volatilité et n’ont pas besoin d’être mis en suspension dans un solvant organique tel que l’hexane ou le méthanol. Cela permet d’élargir la gamme des composés analytiques possibles.
Inconvénients : Coût
L’exploitation d’un système HPLC nécessite l’utilisation de nombreux consommables, tels que les solvants, les filtres et les tubes en plastique. Les joints d’étanchéité et les rotors de la pompe doivent également être remplacés régulièrement pour un fonctionnement optimal. Enfin, les colonnes HPLC ont une durée de vie limitée (environ 500 à 2000 injections) et doivent être remplacées pour une chromatographie adéquate. Les colonnes sont l’article le plus cher dans un système HPLC, et selon la composition du matériau d’emballage, elles peuvent varier de 195 € à 585 €.
Inconvénients : Maintenance élevée
Les systèmes HPLC sont des pièces complexes de machines avec de nombreuses pièces mobiles. Les erreurs et les fuites logicielles peuvent survenir à tout moment, de sorte que la connaissance des symptômes du système est essentielle pour résoudre tout problème. Les procédures d’entretien préventif appropriées doivent être effectuées par un technicien qualifié afin de prévenir les dysfonctionnements majeurs du système. Le remplacement de divers joints de pompe, rotors et colonnes ne sont que quelques-unes des tâches qui doivent être effectuées de façon routinière.
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